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IDT qPCR引物、双淬灭探针代理

 

北京泽平代理的美国IDT(Intergated DNA Technologies)针对实时荧光定量PCR(qPCR)研发了丰富的试剂工具,依靠IDT固有的先进oligo寡核苷酸制造能力,以及专有双淬灭基团和无授权限制的荧光染料,构建了高质量的qPCR产品,满足基因表达定量分析、单核苷酸多态性SNP鉴定等不同需求,其标准型和GMP产品,可轻松实现从研发到生产的过渡,其GMP生产工厂符合:2003认证,满足美国FDA 21CFR Part 820要求。

IDT实时荧光定量qPCR引物、探针代理

IDT的oligo寡核苷酸制备工艺,化学耦合效率(全长寡核苷酸百分比)更高,标准产品效率达到99.25%,Ultramer系列产品高达99.5%,全长oligo得率更高,可获得更高质量的qPCR引物和探针。例如合成40个碱基的探针,IDT探针纯度更高,可达到75%-80%,而同类产品纯度只有50%左右。

IDT实时荧光定量qPCR引物、探针代理

 

 

一、PrimeTime双淬灭探针——基因表达定量分析

市面常见的单淬灭探针,荧光基团与淬灭基团间隔20-30个碱基,IDT PrimeTime双淬灭探针(ZEN双淬灭探针、TAO双淬灭探针),通过在距离荧光基团9bp处内置专有ZEN或TAO淬灭基团,使淬灭更彻底,呈现更低的荧光本底,其Cq值更低,扩增曲线升得更高,荧光信号更强,灵敏度更高。

IDT PrimeTime双淬灭探针代理商北京泽平

IDT PrimeTime双淬灭探针代理商北京泽平

 
随着探针长度的增加,单淬灭探针的淬灭效果逐渐变差,荧光本底升高,而IDT双淬灭探针仍然保持一个较低的本底水平,提高了长序列探针的表现。
IDT PrimeTime双淬灭探针一级代理商北京泽平


IDT PrimeTime双淬灭探针优势

①使用方便——IDT探针提供多种常见荧光基团和淬灭基团,也可定制列表中未展示的基团,无需专利使用费。IDT可同时提供双淬灭探针、传统单淬灭探针。

IDT PrimeTime双淬灭探针一级代理商北京泽平

②高灵敏度——双淬灭探针降低荧光背景,提高qPCR检测的灵敏度。

③一致性——所有探针采用HPLC纯化,剔除游离染料和截断的合成产物,经质谱法验证,具有更高的批间一致性。

④规模效益——依托于IDT先进的合成工艺,oligo全长终产物比例更高,提升寡核苷酸的质量,尤其进行大规模合成时,性价比更具优势。

⑤GMP供应——除常规科研用oligo外,IDT还可提供GMP标准探针,满足更进一步生产需求。

 

 

二、Affinity Plus锁核酸探针——SNP鉴定

LNA(locked nucleic acid)锁核酸,是一种经过修饰的核酸类似物,核糖的2'-O位和4'-C位形成氧亚甲基桥,并连接成环形,降低了核糖结构的柔韧性,对DNA、RNA有强大的亲和力,并提高Tm值,因而可以设计序列更短的探针,提高对单碱基错配的敏感度,应用于SNP基因分型中对1个碱基差异的识别。
 
IDT Affinity Plus qPCR探针LNA锁核酸探针一级代理商北京泽平

IDT的锁核酸探针——Affinity Plus qPCR探针,可根据研究者需要为指定位点掺入锁核酸,提高Tm值,合成简便,无专利使用费,价格较同类产品更具优势,大量用于SNP分型检测中,尤其是品质欠佳的样本(FFPE组织、生物流体等)。

 

 

三、MGB Eclipse探针——GMP标准,SNP鉴定

IDT专业GMP标准的MGB Eclipse探针包含一个5'端荧光基团、一个3'端淬灭基团,以及一个MGB配体(minor groove binder,小沟结合物),可显著提高探针Tm值。15bp的MGB探针Tm即可达到68~70℃,大幅提升了探针特异性,与LNA一样广泛应用于SNP检测中。
IDT MGB Eclipse探针一级代理商北京泽平


IDT MGB探针背景信号更低,Cq值更低,信号更灵敏,无专利使用费,与GMP标准的引物配合,可形成完整的qPCR分析试剂。
IDT MGB Eclipse探针一级代理商北京泽平

 

 

四、rhAmp SNP基因分型系统——高性能SNP解决方案

IDT的rhAmp SNP基因分型试剂盒,包含定制的rhAmp引物、通用报告探针、Taq聚合酶、RNase H2等。rhAmp的3'端包含的blocking基团可阻止引物结合模板进行延伸、一个RNA碱基、5'端包含一段可被通用探针识别的序列。
IDT rhAMP SNP基因分型试剂盒一级代理商北京泽平

 
使用时根据SNP目标序列的碱基差异设计2种rhAmp引物,分别结合模板后,RNase H2对RNA碱基附近的错配敏感,只有当引物和模板正确匹配时,RNase H2将RNA碱基和blocking基团同时切除,引物得以正常延伸,PCR产物含有能被其中一种通用探针识别的序列。2条通用报告探针分别携带不同颜色的荧光基团,其中一种能匹配PCR产物,通过荧光测定,可推断正确匹配的引物,进而推断基因型。

IDT rhAMP SNP基因分型试剂盒一级代理商北京泽平


IDT rhAmp SNP基因分型系统优势

①rhAMP引物特殊的blocking设计,提高识别特异性,不形成引物二聚体;

②高保真RNase H2、高保真Taq聚合酶的双酶系统,提高了错配鉴定的灵敏度;

③采用通用报告探针,不用单独设计探针,降低了每个基因型的鉴定成本。

④方便的单管操作,3小时内完成实验和数据分析。

IDT rhAMP SNP基因分型系统,超高性能水平,其90%以上的识别准确率>99.5%;100次的小包装规格,满足客户的的小规模测试需求。

 

 

五、Primetime Master Mix——基因表达预混液

IDT的qPCR预混液——Primetime Gene Expression Master Mix 是2×溶液,含有热启动抗体、Taq聚合酶、dNTP、MgCl2和其他两步法RT-PCR所需的组分,不含参比荧光染料(可单独提供)。

Master Mix使用便捷,可用于IDT定制引物/探针,也可兼容其他厂家的引物/探针,适用于常规的qPCR仪,可使用标准循环程序、快速循环程序,使用时根据qPCR仪特性额外加入/不加参比荧光。

IDT Master Mix可常温运输,配置反应体系后,不论立刻实验,还是室温下放置一天,均不影响反应效果,并具备良好的批次间一致性。
 
IDT Primetime Gene Expression Master Mix qPCR预混液一级代理商北京泽平


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