Cyitva Percoll/Percoll Plus细胞分离液
——密度梯度法离心分离人淋巴细胞/大鼠兔子细胞/细胞器/病毒
北京泽平代理瑞典进口思拓凡Cytiva（原GE Healthcare Life Sciences，GE）Percoll淋巴细胞分离液（即Percoll分层液、Percoll密度梯度离心介质、分离介质），提供Percoll、Percoll Plus全系列密度梯度分离液，用于提取纯化人、小鼠、大鼠、兔子等各类动物细胞（例如血液、骨髓、脾脏、肝脏、肺、肠道、脑组织的淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞等免疫细胞/白细胞、人外周血单个核细胞PBMC、中性粒细胞、原代肝脏细胞、小胶质细胞、星形胶质细胞、肠上皮细胞、肿瘤细胞、TIL肿瘤浸润淋巴细胞），以及植物细胞、细菌、真菌、病毒等，覆盖细胞、细胞器（如线粒体）、细胞亚颗粒、病毒的提取纯化。
Cytiva（原GE）Percoll/Percoll Plus 细胞分离液参考文献丰富，自1977年上市以来，广泛用于生命科学实验室基础研究中各类细胞、细胞亚结构、病毒的提取纯化。Percoll成分为聚乙烯吡咯烷酮（PVP）涂层二氧化硅胶体，Percoll Plus成分为硅烷共价包覆二氧化硅颗粒，通过将Percoll/Percoll Plus原液配置为不同密度分离液，可进行不连续密度梯度离心（非连续性密度梯度离心）、连续密度梯度离心，具有比Cytiva Ficoll淋巴细胞分离液更广阔的应用范围。
Cytiva（GE）Percoll/Percoll Plus 溶液密度梯度法分离细胞原理
在梯度介质中，样品中不同颗粒密度不同，因此在一定离心力下，不同密度颗粒可沉降至特定位置，从而进行分离。
·沉降速率与颗粒大小成正比；
·沉降速率与颗粒和周围介质的密度差成正比；
·当颗粒密度与周围介质的密度相等时，沉降速率为0；
·随着介质粘度的增加，沉降速率降低；
·随着离心力的增加，沉降速率随之增加。
Cytiva（GE）Percoll/Percoll Plus 细胞分离液优势
1、应用广泛：可实现1.0~1.3g/mL范围内的密度梯度离心分离，适用于大多数密度在1.0~1.2g/mL的细胞、亚细胞颗粒、细胞器、低至70S的病毒。
| Percoll适用物种 |
Percoll适用组织 |
Percoll分离样本 |
| 人 |
外周血 |
淋巴细胞 |
| 大鼠 |
骨髓 |
单核细胞 |
| 小鼠 |
肝脏 |
NK细胞 |
| 仓鼠 |
脾脏 |
红细胞 |
| 兔子 |
肺 |
骨髓细胞 |
| 猕猴 |
肠道 |
中性粒细胞 |
| 狨猴 |
大脑 |
嗜酸性细胞 |
| 狗 |
乳腺 |
嗜碱性细胞 |
| 猫 |
睾丸 |
巨噬细胞 |
| 猪 |
胰腺 |
肥大细胞 |
| 牛 |
心脏 |
肝脏细胞 |
| 马 |
甲状旁腺 |
精子 |
| 羊 |
扁桃体 |
睾丸间质细胞 |
| 鳟鱼 |
腹膜 |
胸腺细胞 |
| 火鸡 |
肾 |
胰岛细胞 |
| 细菌 |
子宫 |
内皮细胞 |
| 真菌 |
蜕膜组织 |
胚胎滋养层 |
| 病毒 |
胎盘 |
血小板 |
| 原生动物 |
胸腺 |
细胞膜 |
| 微藻 |
肿瘤组织 |
细胞质膜 |
| 植物 |
种子/胚乳 |
细胞核 |
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溶酶体 |
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线粒体 |
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原生质体 |
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叶绿体 |
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高尔基体 |
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脂质囊泡 |
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微体 |
2、使用灵活：可预先形成梯度，或通过角转子以中速离心自发产生梯度，进行非连续性密度梯度离心、连续密度梯度离心。
3、快速分离：粘度低，用预先形成梯度可在几分钟内用较低离心力（200×g~ 1000×g）快速完成细胞分离。
4、无菌，可重复灭菌：未稀释的Percoll原液、Percoll Plus原液和稀释液，均可用120℃ 30min重复高压灭菌。
5、无细胞毒性：成分为聚乙烯吡咯烷酮（PVP）涂层二氧化硅胶体（Percoll）、或硅烷共价包覆二氧化硅颗粒（Percoll Plus），呈化学惰性，不会渗透生物膜，不会粘附在膜上。
6、生理pH、等渗：低渗透压，很容易用生理盐水、平衡盐溶液或细胞培养基调整为生理离子强度和pH，在全部梯度中及梯度形成过程中实现等渗。
7、保持活力、形态：操作条件温和，保持细胞、细胞器、病毒的活性和膜完整性。
8、兼容下游实验：容易去除，和生物材料兼容，不影响被分离样本的进一步研究。
9、pH范围广：可在pH5.5~pH10的溶液内使用。如低于pH5.5、或二价阳离子存在，将发生凝胶作用，升温会加剧凝胶产生。
10、稳定性高：未开封可室温保存5年，-20°C下保存6个月。-20°C储存后，融化时会形成梯度，使用前必须将瓶子混合。预先形成的梯度如果未冻结，可存储数周，梯度形状不改变。
11、结果可靠，文献丰富：Percoll细胞分离液于1977年上市，技术成熟，结果可靠，可提供海量文献参考，技术支持强大，助力实验快速推进。
| |
Percoll密度梯度离心介质 |
Percoll Plus 密度梯度离心介质 |
| 成分 |
硅溶胶和非透析聚乙烯吡咯酮形成的涂层胶粒，直径15~30nm粒珠 |
硅溶胶和硅烷共价结合的胶粒 |
| 密度 |
1.130±0.005g/ml |
| 渗透压 |
max 25mOsm/kg H2O |
＜30mOsm/kg H2O |
| 粘度 |
10±5cP at 20°C |
＜15cP at 20°C |
| pH |
9.0±0.5 at 20°C |
9.4±0.5 at 20°C |
| 电导率 |
max 1.0mS/cm |
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| 干榨中碳含量 |
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4.0~5.5% |
| 内毒素 |
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max 2EU/ml |
| 120℃ 30min灭菌 |
原液未稀释可灭菌 |
原液、稀释液均可灭菌 |
| 优势 |
普适型 |
性质更稳定
内毒素含量更低（＜2EU/mL），可提供法规文件（RSF） |
| 应用 |
实验室基础研究 |
医学研究 |
| 产品名称 |
包装规格 |
货号1 |
货号2 |
| Percoll PLUS 细胞分离液（密度梯度离心介质） |
250mL |
17544502 |
17-5445-02 |
| 1L |
17544501 |
17-5445-01 |
| 6×1L |
17089109 |
17-0891-09 |
| Percoll 细胞分离液（密度梯度离心介质） |
250mL |
17089102 |
17-0891-02 |
| 1L |
17089101 |
17-0891-01 |
Cytiva（GE）Percoll/Percoll Plus 不同浓度配制方法（原液稀释方法）
1、常规方法（两步法）
①配置SIP储存液：1份1.5M NaCl或2.5M蔗糖加入到9份Percoll/Percoll Plus 原液中，得到SIP溶液。
②稀释：用0.15M NaCl或0.25M蔗糖溶液，将SIP溶液稀释到所需浓度。
2、Percoll计算器（一步法）
通过Cytiva在线工具（https://www.cytivalifesciences.com.cn/zh/cn/support/online-tools/cell-preparation/percoll-calculator），自动计算溶液配比。
Cytiva（GE）Percoll/Percoll Plus 梯度离心法操作步骤
1、连续密度梯度离心（预制梯度，离心自动形成梯度）
①将储存液稀释为需要最大分辨率范围中间的一个密度。
②在角转头上30,000×g离心15min形成梯度。
③形成梯度后，细胞等密度区带能够通过400×g低速离心15~20min完成。
2、不连续密度梯度离心
①将不同密度的Percoll稀释液层层叠加，缓慢加入，密度大的位于下层。
②离心条件相对温和。
3、原位形成梯度
多用于分离亚细胞颗粒和病毒。
①用蔗糖制备SIP储存液，并用0.25M蔗糖溶液将SIP溶液稀释为所需要的密度。
②将样品与梯度材料混合。
③用角转头离心。
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