Lonza人骨髓来源间充质干细胞BMSC/hMSC
——广泛分化潜能,最常使用的间充质干细胞来源
间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)具有三系分化能力,分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞,这也是鉴定间充质干细胞的关键标准。
目前,已经从许多不同的组织中分离了间充质干细胞,包括骨髓、脂肪、软骨、肌肉、骨骼、脐带、胎盘。这些不同组织来源的细胞都具有三系分化能力(骨、软骨、脂肪),并显示出相似的表面标志物表达谱。但不同来源的间充质干细胞,其生物学特性也有所区别,在分化为骨、软骨、肌肉、神经元、皮肤、角膜等各种细胞的潜能,以及免疫调节功能方面,具有显著差异。间充质干细胞这种依赖于起源的特征,强烈暗示了围绕其的组织微环境(通常称为干细胞小生境)的关键作用。
图1、骨髓来源间充质干细胞的多谱系潜能
在正常条件下,间充质干细胞保持静止状态。在组织损伤而受到生物信号刺激时,间充质干细胞被激活并经历对称或不对称,并聚集到损伤部位以替换或再生受损组织。由于其强大的修复潜力,间充质干细胞已被用于各种骨缺损和软骨损失的研究,例如膝盖半月板受伤或长期累积的损伤研究(导致骨关节炎)。
此外,间充质干细胞可帮助受损组织中形成新血管,对心脏病等疾病导致的组织损伤修复研究具有重要意义。间充质干细胞还具有减轻炎症、减慢自身免疫性疾病进展的能力,已用于克罗恩病、多发性硬化症、狼疮、COPD、帕金森病的研究。
间充质干细胞研究
骨和软骨疾病:骨质疏松、骨折、骨转移、成骨不全、膝关节软骨缺损。
心血管疾病:缺血性心力衰竭、心肌梗塞、肾血管性高血压。
自身免疫性疾病:克罗恩病、移植物抗宿主病、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎。
人骨髓来源间充质干细胞(Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,hMSC或BMSC, 又称为人骨髓间充质细胞),由于广泛的分化潜能,研究最多。人的骨髓包含造血干细胞(Hematopoietic Stem Cells, HSCs)和属于“间质”细胞群的各种不同类型的细胞,其中的间充质干细胞很少,仅占细胞总量的0.001%-0.01%。
根据国际细胞治疗学会间充质和组织干细胞委员会规定的标准,人骨髓来源间充质干细胞,表面抗原/标记(存在于细胞膜上的特殊蛋白质和碳水化合物,可定义细胞类型)CD105、CD73、CD90应为阳性,CD45、CD34、CD14、CD11b、CD79a或CD19、HLA-DR应为阴性(造血干细胞标记)。同时,当被诱导时,人骨髓来源间充质干细胞应能在体外分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞。
人骨髓间充质干细胞在适宜的培养条件下,初始培养物中具有最高分化潜能且快速增殖的细胞占比很大,细胞呈现为纺锤形,在随后的传代过程中,失去三系分化能力的细胞占据主导地位,外形呈现大型扁平状,因而不建议人骨髓间充质干细胞传代超过5代以上。通常,在第2至第4代,可以收获培养的细胞,并将其转移到特定的诱导培养基中,以促进分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞。脂肪细胞和成骨细胞通常在5-7天后形成,软骨细胞在14天后出现。
Lonza人骨髓来源间充质干细胞
中文名称:正常人骨髓来源间充质干细胞
英文名称:hMSC - Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells
细胞货号:PT-2501
本款基础研究用人骨髓来源间充质干细胞,来自正常(非糖尿病)成年人,是从捐赠者的后双侧穿刺取出的骨髓分离而来,传代2次后冷冻保存,建议在第5次传代前使用。每批次细胞确认CD44、CD73、CD90、CD105、CD166阳性,CD14、CD34、CD45、HLA-DR、CD19阴性,每支含有≥750,000个细胞,在推荐的Lonza分化培养基中,本款细胞确认可分化为脂肪、软骨、成骨细胞。
Lonza人骨髓来源间充质干细胞培养基
Lonza骨髓来源间充质干细胞培养基,由基础培养基和SingleQuots添加剂及生长因子组成,其中每个组分可单独购买。当配合Lonza人骨髓来源间充质干细胞,并按照Lonza官方指导操作时,能确保细胞呈现良好的生长、分化状态。
1、生长培养基
货号:PT-3001
英文名称:MSCGM Mesenchymal Stem Cell Growth Medium BulletKit
中文名称:MSCGM间充质干细胞培养基
套装组成:MSCGM基础培养基(货号:PT-3238)+ MSCGM SingleQuots生长因子(货号:PT-4105)
本款人间充质干细胞生长培养基含有经特殊筛选的血清,确保细胞不会形成自发分化,也不抑制其未来的成骨、软骨、脂肪的三系分化。
2、成骨分化培养基
货号:PT-3002
英文名称:Human Mesenchymal Stem Cell (hMSC) Osteogenic Differentiation Medium BulletKit
中文名称:hMSC人间充质干细胞成骨分化培养基
套装组成:成骨分化基础培养基(货号:PT-3924)+ 成骨分化SingleQuots添加剂及生长因子(货号:PT-4120)
本款成骨分化培养基是含血清培养基,可在短短14天内诱导750,000个人骨髓来源间充质干细胞(以6孔板的形式约25孔),完全分化为成熟、功能活跃的成骨细胞。
3、软骨分化培养基
货号:PT-3003
英文名称:Human Mesenchymal Stem Cell (hMSC) Chondrogenic Differentiation Medium BulletKit
中文名称:hMSC人间充质干细胞软骨分化培养基
套装组成:软骨分化骨基础培养基(货号:PT-3925)+ 软骨SingleQuots添加剂及生长因子(货号:PT-4121)
本款软骨分化培养基是含血清培养基,可在短短14天之内,通过添加TGF-β3将2,000,000个人骨髓来源间充质干细胞(约4个完整的24孔板),诱导完全分化为成熟、功能活跃的软骨细胞。并可通过多种方法验证分化,包括用阿尔辛蓝或番红染色。
4、脂肪分化培养基
货号:PT-3004
英文名称:Human Mesenchymal Stem Cell (hMSC) Adipogenic Differentiation Medium BulletKit
中文名称:hMSC人间充质干细胞脂肪分化培养基
套装组成:成脂维持培养基(货号:PT-3102A)+ 成脂诱导培养基(货号:PT-3102B)+ 成脂维持SingleQuots添加剂及生长因子(货号:PT-4122)+ 成脂诱导SingleQuots添加剂及生长因子(货号:PT-4135)
本款脂肪分化培养基是含血清培养基,可在短短19天之内诱导3,000,000个人骨髓来源间充质干细胞(以6孔板形式约15孔),完全分化为成熟的、功能活跃的脂肪细胞。
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——Lonza中国一级代理商,北京泽平