Lonza 4D电转仪LV大体积转染单元
——全封闭GMP级别20mL流式电转仪

 
北京泽平代理的德国进口龙沙Lonza 4D-Nucleofector LV大体积细胞核转染单元（4D-Nucleofector LV Unit，简称Lonza 4D电转仪LV单元，原Amaxa Nucleofector核转仪LV单元），是一款大规模流式电穿孔转染系统，可在5min内连续转染10⁹个细胞，全封闭无菌系统和耗材，符合FDA 21 CFR Part 11的软件，满足GMP级别细胞商业生产需要，常用于转染CHO、293细胞进行蛋白、抗体生产，或对免疫细胞、干细胞进行CRISPR/Cas9基因编辑、CAR-T细胞治疗研究等。



Lonza LV流式细胞电转仪，作为Lonza 4D电转仪（Lonza 4D-Nucleofector System）的一个功能模块，采用Lonza专利Nucleofector（原Amaxa Nucleofector）细胞核转染技术，基于电穿孔原理，通过对流式电转仪、电转液、电转染程序三方面进行整体优化，可将DNA、RNA、质粒、多肽、蛋白质、核糖核蛋白复合体RNP、小分子化合物等转入细胞质，并跨过核膜直接进入细胞核中，实现原代细胞、干细胞、难转染细胞系的高转染效率、高细胞活率，实验结果具备高重复性。其中质粒转染效率可达90%，siRNA转染效率可达99%，不依赖于细胞有丝分|裂，转染GFP质粒最快2小时可观察到蛋白表达。


Fig. Primary NHDF-neo cells were transfected with labeled plasmid DNA encoding GFP, fixed after 2h in 3.5%PFA and analyzed by confocal microscopy.

 

 

Lonza Nucleofector细胞核转染技术自2001年上市以来，全球发表文章超过36,000篇，被广泛应用于CRISPR/Cas9、CAR-T、CAR-NK、干细胞、外泌体药物递送等前沿研究中。



 

 

Lonza流式电转系统，依靠优化的流式电转设备、针对细胞类型优化的电转液配方、仪器内置的优化电转程序，全方位提高细胞电转效率。
 


1、Lonza流式细胞电转染仪——10⁹个细胞高效转染，GMP级别细胞生产

LV单元专业用于单一细胞GMP标准大规模转染。由于Lonza 4D电转仪所有模块采用相同的转染程序（Y单元除外），通常利用X单元进行小规模转染，建立更优转染方案，LV单元直接调用该程序，无需修改转染条件，方便地扩大细胞规模，实现5min内高达10⁹个细胞的高效转染。其全封闭转染环境，管理软件符合FDA 21 CFR Part 11法规，满足审计追踪需求，支持实验室基础研究向GMP商业化应用的快速转化。



Lonza 4D电转仪采用功能模块堆叠形式，LV单元使用时必须连接C单元（Core Unit，C模块），C单元内置根据不同细胞类型优化的电转程序，使用时通过触摸屏选择程序，无需设置电转仪参数如电压、电阻、电脉冲等，一键调用程序，操作简单。通常建议采购C+X+LV模块，满足从小规模到大规模电转需求的转移。


图.使用相同条件转染少量细胞（X单元100μL电转杯）和大量细胞（LV单元1mL或20mL电转盘）的结果对比。转染采用pmaxGFP质粒，以PI染色判断细胞活力。数据计算采用多次实验的平均。

 

 
2、Lonza电转仪LV单元专用电转试剂盒——提高转染效率和细胞活率，GMP级别耗材

Lonza LV流式细胞电转仪专用转染试剂盒，由转染试剂、补充剂、电击耗材、pmaxGFP阳性对照质粒等组成。

①电转试剂——根据不同细胞单独优化转染液和补充剂配方，以提高转染效率和转染后细胞活率，维护细胞正常生理功能。包含5种原代细胞转染试剂（P1-P5）、3种细胞系转染试剂(SE、SF、SG)，适用于所有细胞类型。同种细胞不同底物采用相同转染试剂盒，可实现多种底物共转染。



②电击耗材——提供2种电转盘耗材，采用可导电的高分子聚合物电极，相比传统铝电极，非金属电极避免了金属离子造成的细胞毒害。其中1mL电转盘，需要手动加样，每次电转1mL最多10⁸个细胞；20mL（1mL*20）电转盘，可通过导管从储液罐、储液袋自动进样，每次电转1mL，连续进样20次，电转最多10⁹个细胞，符合GMP标准。
 


 

 
3、Lonza全球共享转染数据库——丰富数据参考

免费在线数据库（https://knowledge.lonza.com），提供超过759种细胞类型的转染程序，支持使用USB升级Lonza电转仪本地软件系统，增加本地数据库。同时提供包括细胞来源、传代、培养条件、转染程序选择和操作技巧、转染后培养、历史转染结果等，数据持续更新，加之全球科研人员海量成功案例，提供了强有力的实验参考和支持，使研究者可以专注于研究本身，快速推进实验进程。
 


 

 

Lonza LV流式电转仪操作步骤图解



 

 

Lonza LV流式电转仪参数

品牌	Lonza龙沙
产地	德国科隆
型号	4D-Nucleofector
中文名称	C单元（核心单元，C模块）	LV单元（LV模块）
英文名称	4D-Nucleofector Core Unit	4D-Nucleofector LV Unit
货号	AAF-1003B	AAF-1002L
用途	储存、运行转染程序，连接X、Y、96孔、LV单元	单一细胞大量转染，GMP级别耗材，软件符合FDA 21 CFR Part 11，用于商业化细胞产品生产
转染底物		DNA、RNA、质粒、多肽、蛋白质、核糖核蛋白复合体RNP、小分子化合物
转染细胞		动物原代细胞、干细胞、细胞系，外泌体
转染试剂盒类型		P1-P5、SE、SF、SG
电极材料		导电高分子聚合物
耗材		1mL手动进样电转盘
		20mL（1mL*20）自动连续进样电转盘，提供GMP级别试剂盒
转染细胞数量		1mL电转盘：1*107-1*108
		20mL电转盘：1*107-1*109
使用方法		①1mL电转盘手动加样。 ②20mL电转盘通过导管自动加样，每次进样1mL进行电转，连续进样20mL。
宽*高*深	24.5cm*14.7cm*28cm	24.5cm*20.7cm*28cm
重量	4.4 kg	5.7 kg
电源	100 - 240 VAC，50 - 60 Hz
工作温度	15°C-40°C

 

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——Lonza中国一级代理商，北京泽平

 

 
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