NEB末端修饰酶
——末端磷酸化、去磷酸化、末端补平、末端加A尾

 
北京泽平代理美国进口NEB碱性磷酸酶、T4磷酸激酶、T4 DNA聚合酶、Klenow片段（DNA聚合酶I大片段）、快速末端平齐试剂盒、Taq DNA聚合酶等，用于DNA末端磷酸化、去磷酸化、末端补平/末端平齐化、末端加A尾等。NEB末端修饰酶提供丰富产品选择，经严格质控，性能稳定可信赖。



 
一、末端磷酸化——T4 PNK

NEB T4 多聚核苷酸激酶（T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK，货号M0201），支持对DNA、RNA进行5'末端磷酸化，以进行连接反应，并同时具有3'磷酸酶活性，可去除3'磷酸基团，可用于对DNA、RNA进行末端标记，作为探针和进行DNA测序。

 
二、末端去磷酸化——碱性磷酸酶

1、NEB虾碱性磷酸酶（rSAP）

NEB虾碱性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase，rSAP，货号M0371），是一种不耐热的重组碱性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反应中的游离dNTP。NEB虾碱性磷酸酶可用于线性化质粒DNA去磷酸化防止自连、用于克隆或探针末端标记、制备DNA测序和SNP分析模板等。NEB虾碱性磷酸酶rSAP在65℃下加热5min可完全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除，减少纯化步骤。


2、NEB热敏磷酸酶（AnP）

NEB热敏磷酸酶（Antarctic Phosphatase，AnP，货号M0289），是不耐热的重组碱性磷酸酶，反应条件灵活，兼容各类限制性内切酶缓冲液，无需纯化，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反应中的游离dNTP。NEB热敏磷酸酶可用于防止线性载体自连、制备DNA测序和SNP分析模板。NEB热敏磷酸酶AnP在80℃下加热2min可完全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除，减少纯化步骤。


3、NEB快速CIP

NEB快速CIP（Quick CIP，货号M0525），是热敏重组型小牛肠碱性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可在10min内完成5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端的去磷酸化，也可用于降解PCR反应中的dNTP。相比小牛肠碱性磷酸酶CIP，NEB快速CIP活性更高，所需酶量更少，降低每次反应的成本；无需锌等额外添加剂，并缩短温育时间；兼容各类限制性内切酶缓冲液，无需纯化；快速且不可逆的热失活特性，减少纯化步骤；重组酶具备更高纯度、更高批次间一致性、更高性价比。NEB快速CIP在80℃下加热2min可完全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除。

 

 

 
三、末端补平/末端平齐化

1、NEB T4 DNA 聚合酶

NEB T4 DNA 聚合酶（T4 DNA Polymerase，货号M0203）， 具有5'→3'方向DNA合成功能，以及很强的3'→5'核酸外切酶活性，可进行缺口填充，切除3'突出末端或补平5'突出末端，形成平末端。NEB T4 DNA 聚合酶不具有5'→3'核酸外切酶活性。


2、NEB DNA 聚合酶I大片段（Klenow片段）

NEB DNA 聚合酶I大片段（DNA Polymerase I, Large Fragment，Klenow片段，货号M0210），是大肠杆菌（E. coli）DNA聚合酶I的蛋白水解产物，保留了聚合酶活性，以及3'→5'核酸外切酶活性，但不具有5'→3'核酸外切酶活性。


3、NEB快速末端平齐化试剂盒

NEB快速末端平齐化试剂盒（Quick Blunting Kit，货号E1201），可以将不匹配的DNA 5'或3'突出末端转化为5'磷酸化的平末端，可在30min内完成限制性内切酶消化的DNA末端平齐化，以便与平末端DNA克隆载体连接。NEB快速末端平齐化试剂盒作为即用型预混液，可在室温下反应，适用于剪切的、雾化的、经限制性内切酶消化的DNA进行末端平齐化，以便与质粒、粘性质粒cosmid、F黏粒fosmid、BAC载体进行连接。

 


四、末端加A尾

1、NEB Klenow 片段

NEB Klenow 片段（Klenow Fragment，货号M0212），重组来源，保留了聚合酶活性、不具有5'→3'核酸外切酶活性，经突变（D355A、E357A）去除了3'→5'核酸外切酶活性，可用于向PCR产物的平末端添加A尾。

 
2、NEB Taq DNA 聚合酶

NEB Taq DNA 聚合酶（Taq DNA Polymerase）在PCR反应时，可在每条PCR扩增产物末端自动添加一个3'-A突出末端，直接用于T/A连接。NEB提供多种热启动Taq DNA聚合酶，满足各类实验需求。

 

 
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