分离提取自鲎血的鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate，美洲鲎试剂，简称LAL），是一种历史悠久、使用广泛的细菌内毒素检测试剂，被各国药典所认可。Lonza品牌的内毒素检测用鲎试剂产品，已有近40年的研发应用历史，并获得了美国FDA认证（License No.1775）。

目前，北京泽平代理的LONZA品牌提供多种检测方法的鲎试剂产品，包括美洲鲎试剂（LAL）、不依赖于鲎血的重组C因子试剂，以及配套使用的酶标仪、荧光检测仪，提供符合FDA Part 11的内毒素检测专用软件等，可实现0.005-100EU/mL范围的内毒素定性、定量检测。


一、动态显色法鲎试剂

Lonza动态显色法鲎试剂（Kinetic-QCL Kinetic Chromogenic LAL Assay，简称KQCL），是一种动态、定量检测内毒素的试剂盒。在内毒素的存在下，动态显色法鲎试剂将无色的发光短肽底物中的显色基团PNA切下，使溶液呈现，颜色变化的时间和内毒素含量呈负相关，通过检测分光光度计405nm下的光密度OD值变化，绘制内毒素浓度标准曲线，即可计算出未知样本中的内毒素含量。

Lonza动态显色法鲎试剂，是Lonza最灵敏的内毒素检测试剂，无需形成凝胶，相比凝胶法、浊度法，受到的抑制反应更少，抗干扰能力最强，检测范围广（405nm处吸光的深样品不可用），其0.005-50EU/mL的灵敏度，非常适合生物制品如疫苗、抗生素等检测。

使用时，将混合有鲎试剂和底物的冻干粉复溶，放入96孔板中，加入待测样品，在405nm吸光度检测颜色变化，动态监控其显色反应时长，反应时间约1小时后（根据内毒素限值而定），计算样品内毒素含量。
 


 
 
二、动态浊度法鲎试剂

Lonza动态浊度法鲎试剂（PYROGENT-5000 Kinetic Turbidimetric LAL Assay），是一种动态、定量检测内毒素的试剂盒。内毒素存在下，动态浊度法鲎试剂形成凝胶，使溶液变浑浊，浊度变化的时间与内毒素含量成反比，通过检测吸光度变化时间，建立内毒素标准曲线，可以计算出未知样品中的内毒素含量。

Lonza动态显色法鲎试剂，灵敏度0.01-100EU/mL，检测范围大，可以检测有色样品，按照美国FDA相关许可生产，当检测水和大容量液体时更具性价比。

使用时，将鲎试剂和缓冲液混合，置于中37℃孵育，添加样品混匀后，动态检测浊度变化，反应时间约1小时后（根据内毒素限值而定），计算样品内毒素含量。



 

三、重组C因子荧光检测试剂盒

Lonza PyroGene重组C因子内毒素检测试剂盒（PyroGene Recombinant Factor C Endpoint Fluorescent Assay），是一种终点法、定量检测内毒素的试剂。其不含鲎血成分，是LAL鲎试剂的可持续替代方案。C因子是鲎试剂酶促反应中的第一个组成部分，重组生产的C因子（rFC），在内毒素存在下被激活，不激活LAL级联反应中的其他酶，而是直接裂解荧光底物，释放荧光，建立内毒素标准曲线，可计算样品的内毒素含量。

Lonza重组C因子荧光检测试剂盒，采用终点分析法，高通量分析更简单，荧光信号范围广，只需一步反应，灵敏度0.005-5EU/mL，消除了葡聚糖的假阳性，具有更高的内毒素特异性，非动物源成分，批次间差异小，重复性高。继欧洲药典（EP）、日本药典(JP)、美国药典(USP)之后，第4版本的中国药典将重组C因子法列为细菌内毒素检测方法，并在2020年生效。

使用时，Lonza重组C因子试剂为液态，可按需取用不会浪费试剂，在96孔板中与待测样品混合，孵育1小时，使用380/440nm的激发/发射波长，计算样品内毒素含量。



 

四、终点显色法鲎试剂

Lonza终点显色法鲎试剂(QCL-1000 Endpoint Chromogenic LAL Assay)，是一种终点法、定量检测内毒素的试剂，是Lonza鲎试剂中最快速的检测方法。在内毒素存在下，终点显色法鲎试剂分解底物，使溶液变为，测定405-410nm下的OD值，建立标准曲线，可计算样品内毒素含量。

Lonza终点显色法鲎试剂，16分钟快速检测，仅需一个多道移液器、一个干热装置和一个96孔板。将样品加入96孔板，37℃孵育10分钟，添加显色底物，37℃孵育6分钟，添加终止缓冲液，测定405-410nm OD值。
 




五、凝胶法鲎试剂

Lonza凝胶法鲎试剂(PYROGENT  Gel Clot LAL Assay)，是一种内毒素的限量检测方法。将鲎试剂和样品置于37℃水浴或金属浴中的试管中，孵育1小时，将试管翻转180°，如凝块牢固地附着在试管底部，表明内毒素为阳性。如凝块向下流动，则内毒素为阴性。

Lonza凝胶法鲎试剂提供0.03、0.06、0.125、0.25EU/mL的灵敏度，定量结果通过肉眼观察凝胶形成，不需要复杂的仪器和软件，简便易读，成本低。但实验结果容易受到振动、温度等干扰。

与其它酶促反应一样，凝胶法测定依赖于pH值。Lonza PYROGENT凝胶法鲎试剂包含的缓冲液，使测试前不需要调整样品pH值。



 

六、内毒素检测仪器和软件

1、WinKQCL内毒素检测软件

Lonza专为内毒素检测设计的WinKQCL软件，符合美国FDA 21 CFR Part 11对电子记录和签名、审计跟踪和数据库归档的技术要求，企业级的数据库存储模式，保障了数据完整性、真实性、安全性。趋势分析功能，预判各批次内毒素含量超标情况，让结果分析以及查找更高效。九种语言模式，中英界面快捷切换。能结合LIMS、LIS、MODA等实验室信息管理系统，并可以在Citrix系统上操作。



支持大量常规酶标仪：

①光吸收酶标仪
BioTek ELx808
BioTek Eon
Molecular Devices SpectraMax 340PC,340PC384, Plus384 and 190PC
Molecular Devices VersaMax
Tecan Sunrise

②荧光酶标仪
Lonza PyroWave
BioTek FLx800
Molecular Devices Gemini EM, Gemini XPS and Gemini XS

③多功能酶标仪（光吸收和荧光酶标仪）
BioTek Synergy 2
Molecular Devices SpectraMax M2, M2e, M3,M4, M5 and M5e
Molecular Devices FlexStation
 

2、ELx808酶标仪

专业用于Lonza Kinetic-QCL动态显色法鲎试剂、PYROGENT-5000动态浊度法鲎试剂的酶标仪，并可作为标准分光光度计，用于QCL-1000终点显色法鲎试剂检测。96孔板全自动读取，可存储多达55个试剂盒、测试结果、标准曲线。优秀的温度均匀性，高精确性，根据鲎试剂优化配置，已作为Lonza内毒素检测系统的一部分进行了验证，可无缝对接WinKQCL软件，用于内毒素检测的供应商QC放行检测。




3、PyroWave XM 荧光酶标仪

专业用于Lonza PyroGene重组C因子荧光检测试剂盒，并可作为光度计，可无缝对接WinKQCL软件。具有优秀的温度均匀性，简单易用，根据重组C因子优化配置，用于内毒素检测的供应商QC放行检测。



 
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