如细胞培养体系中存在支原体污染，可能造成细胞生长缓慢、染色体异常、代谢异常、转染效率低、病毒包装效率低、细胞死亡等。造成实验重复性低、结果不可信。由于支原体大小为0.1-0.3μm，无法通过过滤去除，无细胞壁结构，普通抗生素如青霉素等也无效，造成研究者细胞损失。

北京泽平代理的Lonza支原体系列产品，提供从支原体检测、支原体清除、到支原体预防的全套试剂和配套检测仪器，轻松解决各类支原体污染问题。
 

一、Lonza支原体检测试剂盒

Lonza MycoAlert支原体检测试剂盒（MycoAlert PLUS Mycoplasma Detection Kit），可在20分钟内快速检测细胞培养物是否存在支原体污染。其利用了180多种支原体中广泛存在的支原体酶（在脲原体属、细菌、酵母中少见），当活支原体被MycoAlert试剂裂解后，支原体酶释放到培养液中，并与MycoAlert底物特异性反应，催化ADP转化为ATP，ATP与荧光素酶发生反应产生光信号，通过检测底物加入前后读数的比值，可判断样本中是否含有支原体。



①酶学检测，操作简单，20分钟出结果，轻松量化阴性、阳性；
②覆盖范围广，可检测44种支原体，包含细胞培养中最常见的6种支原体（口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾原体、发酵支原体、唾液支原体，占支原体污染的95%）




支原体检测流程

1、取2mL培养基上清（建议培养48小时以上），200g离心5分钟，去除细胞和细胞碎片；
2、取100μL上清，加入100μL裂解试剂（MycoAlert PLUS Reagent，含裂解试剂、荧光素酶、荧光素），裂解支原体；
3、室温22℃（不超过25℃）孵育5分钟，检测背景ATP，测量发光值得到读数A；
4、加入100μL支原体酶特异性底物（MycoAlert PLUS Substrate）；
5、室温孵育10分钟，测量发光值得到读数B，计算B/A比值。
 

结果解读

二、支原体检测仪器

1、Lonza专用单孔生物发光检测仪器Lucetta 2

①小型便携式管式光度计，一键式检测，不需要复杂的软件设置；
②应用广泛，两种基本检测模式，高灵敏度和线性度，最多可储存2000个单一样本读数；
③无特殊耗材，只需要无菌1.5mL离心管即可检测。

 

2、多孔单功能发光检测仪或多功能酶标仪

如使用多功能酶标仪检测，要选择Luminescence检测功能，不需要设置滤光片；如果使用多孔板检测，要用不透明的白板或黑板。

 

三、Lonza支原体清除试剂盒

当发现存在支原体污染，但样品格外难得不可丢弃时，Lonza MycoZap支原体去除试剂，可在4天内清除支原体，拯救珍贵的细胞样品。MycoZap支原体去除试剂，结合抗生素和抗代谢试剂，确保彻底清除支原体。在随后的4-6周内，可以使用Lonza MycoAlert支原体检测试剂盒进行不间断检测，以保证后续培养物不被污染。

①使用范围广，可彻底清除支原体、无胆甾原体、植物花螺原体等柔膜菌纲物种；
②使用简单，只需将支原体清除试剂加入培养基中；
③细胞毒性小，不影响细胞正常培养。



 

四、Lonza支原体预防试剂盒

Lonza MycoZap支原体预防试剂（MycoZap Prophylactic），是一种特异性预防支原体污染的抗生素，其中MycoZap Plus可预防包括支原体、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、酵母在内的多种微生物污染，其配方根据细胞系、原代细胞进行了特殊优化。

更多Lonza支原体检测试剂盒产品，欢迎点击右侧在线咨询
——Lonza中国一级代理商，北京泽平